ABSTRACT
A periodontite é uma doença infecciosa caracterizada pela secreção de uma variedade de mediadores inflamatórios que levam a destruição dos tecidos de suporte dental e possível perda dos dentes, em associação com a infecção por múltiplas espécies bacterianas. Estima-se que mais de 400 espécies colonizam o biofilme dental e algumas das espécies bucais relacionadas à doença periodontal estejam no biofilme subgengival como Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Treponema denticola. Entretanto, outros microrganismos podem estar relacionados a patologia desta doença, como Filifactor alocis e Prevotella tannerae. Esses microrganismos e seus subprodutos, como endotoxinas liberados o meio extracelular, levam ao estímulo da glicoproteína indutora de metaloproteinase (EMMPRIN, CD-147), que estimula a liberação de MMPs por fibroblastos e células endoteliais, levando a destruição do tecido. Com o objetivo de detectar F. alocis, P. tannerae e T. denticola, glicoproteina EMMPRIN (CD-147) e sua correlação com MMP-2 e MMP-9, amostras de fluido subgengival de pacientes com periodontite crônica, foram coletados de sítios sadios e doentes antes do tratamento periodontal básico e após 60 dias do tratamento. Os respectivos DNAs das bactérias foram extraídos e trechos do gene 16S foram amplificados e posteriormente realizados PCR convencional para a análise microbiológica dos microrganismos. Para a quantificação do EMMPRIN (CD-147), MMP-2 e MMP-9 foi usado ELISA-Sandwich. Resultados demonstraram que o grupo doente aumentou significantemente T. denticola, F. alocis e P. tannerae quando comparados com sítios saudáveis. MMP-2 e MMP-9 foram detectados em altas concentrações com redução estatisticamente significante após tratamento periodontal para MMP-2, mas não houve correlação com EMMPRIN.
Periodontitis is an infectious disease characterized by thesecretion of a variety of inflammatory mediators that lead todestruction of tooth supporting tissues, including the possibleloss of alveolar bone, in association with infection with multiplespecies of bacteria. It is estimated that more than 400 speciescolonize the biofilm and some oral species related to periodontaldisease is present in the subgingival including P. gingivalis, T.forsythia and T. denticola. However, other organisms may berelated of this disease, as Filifactor allocis and Prevotella tannerae.These microorganisms and subproducts such as endotoxinsreleased into the extracellular lead to the stimulation of metalloproteinaseinducer glycoprotein (EMMPRIN, CD-147), whichstimulates the release of MMPs by host cells, like fibroblasts andendothelial cells, thus leading to tissue destruction. The objectiveof this study was to detect F. allocis, P. tannerae, T. denticolaand the glycoprotein EMMPRIN (CD-147) and its correlationwith MMP-2 and MMP-9 in subgingival fluid samples of patientswith chronic periodontitis. Fluids were collected from healthyand disease subgingival sites of 20 healthy individuals beforebasic periodontal treatment and after of 60 days of treatment.Their DNAs were extracted and portions of the 16S gene wereamplified and performed conventional PCR. For immunologicalanalysis and quantification of EMMPRIN (CD-147), MMP-2 andMMP-9 was used ELISA-Sandwich. Results demonstrated thatthe disease group showed significantly high amounts of T. denticola,F. alocis and P. tannerae when compared with health sites.MMP-2 and MMP-9 were detected in high concentrations withstatistically significantly reduction after periodontal treatment toMMP-2, but without correlation with EMMPRIN.
ABSTRACT
A correta distinção dos microrganismos envolvidos na patogênese da doença periodontal, torna-se importante para o entendimento da sua progressão e adequado plano de tratamento. Métodos de identificação e quantificação foram desenvolvidos e são considerados extremamente sensíveis e precisos na caracterização das espécies bacterianas. Com isso a presente revisão mostra trabalhos existentes na literatura, os quais analisaram comparativamente os métodos de Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real (qPCR) e cultura bacteriana com objetivo na identificação de periodontopatógenos. Através do método de cultura bacteriana é possível a identificação de novos microrganismos e realização de testes de sensibilidade a antibióticos. O qPCR é um teste microbiológico que identifica e quantifica espécies bacterianas, através da amplificação gênica de fragmentos de DNA pré-determinados, com alta sensibilidade, especificidade e dispendem menor tempo do operador quando comparados a cultura bacteriana. Assim para a escolha de um determinado teste diagnóstico deve-se levar em consideração não somente a sua precisão na identificação dos micro-organismos, mas também a relação custo-beneficio.
The correct distinguishment of microorganisms involved in the periodontal disease pathogen, it is important in the understanding of its progression and adequate treatment planning. Considering this fact, some molecular methods of identification and quantification were developed and are extremely sensitive and precise in the characterization of different bacteria species. The present study aimed to realize a literature review, including studies that realized a comparative analysis between bacterialculture and real time PCR methods in the identification of pathogens. The bacterial culture method can possibly identify new microorganisms and realize antibiotics sensitivity tests. The real time PCR is a microbiologic test that identifies and quantifies bacterial species, through gene amplification of predetermined DNA fragments, with high sensitivity and specificity, and need a shorter operation time of the operator when compared to thebacterial culture method. In this way, to determine a specific diagnostic test, should be considered not only its precision in the identification of microorganisms, but the cost-benefit relationship as well.
ABSTRACT
Os extraordinários avanços no desempenho de técnicas laboratoriais corroboram na evolução do entendimento dos mecanismos das doenças de modo geral, facilitando o tratamento e/ou a prevenção. De fato, informações equilibradas, curadas e atuais estão colaborando de forma estimulante no estudo da relação entre doença periodontal e periapical crônica com o desenvolvimento ou estabelecimento de algumas doenças cardiovasculares. Dessa forma, o objetivo da presente trabalho foi descrever de forma sucinta e objetiva a relação entre doença periodontal crônica e doença periapical como fatores de risco para o desenvolvimento ou estabeleciomento da aterosclerose. Estudos epidemiológicos têm procurado demonstrar que indivíduos com doença periodontal ou periapical poderiam apresentar um aumento significativo do risco de desenvolver algumas doenças sistêmicas incluindo a aterosclerose.